Guanidine Hydrochlorideâ € ”â €” Tái lập protein, hòa tan protein

        Trong quá trình biến tính protein, trước tiên protein cơ thể đưa vào phải được hòa tan. Protein cơ thể hòa nhập đề cập đến sự tập hợp của các protein được biểu hiện bởi vi khuẩn trong tế bào để tạo thành các hạt rắn không hoạt động, vô định hình và không hòa tan trong nước, và chỉ hòa tan trong các chất biến tính như urê vàguanidine hydrochloride.

Sau đó, chất biến tính được loại bỏ từ từ để khôi phục protein mục tiêu từ trạng thái kéo dài hoàn toàn biến tính về cấu trúc gấp nếp bình thường, trong khi chất khử được loại bỏ để cho phép sự hình thành bình thường của các liên kết disulfide. Nói chung, quá trình cải tiến củaguanidine hydrochloridebắt đầu lúc 4M và kết thúc lúc 1,5M. Có một số phương pháp khác nhau:

Pha loãng và cô đặc lại: thêm trực tiếp nước hoặc dung dịch đệm để pha loãng dung dịch và để qua đêm để protein kết tủa ra ngoài. Nhược điểm là thể tích tăng nhiều, tốc độ pha loãng chất biến tính quá nhanh, khó kiểm soát; thẩm tách hoặc siêu lọc tái tạo: cả hai chất biến tính Các chất phân tử nhỏ có thể dần dần xuyên qua màng xốp trong quá trình thẩm tách hoặc siêu lọc, do đó nồng độ chất biến tính của dung dịch protein biến tính giảm dần, và cuối cùng được loại bỏ, do đó protein biến tính được gấp lại và đóng băng lại. Ưu điểm là không làm tăng âm lượng. Tốc độ loại bỏ chất biến tính được kiểm soát bằng cách giảm dần nồng độ của chất thấm bên ngoài, nhưng quá trình này diễn ra chậm và tốn nhiều thời gian; sự biến tính trên cột: Sự biến tính đạt được trong quá trình sắc ký, đã được nghiên cứu và thành công trong thời gian gần đây. Một phương pháp tái chế được sử dụng trong sản xuất. Ưu điểm là khả năng hấp phụ của chất cố định sắc ký tương đối thấp so với protein biến tính, có thể cải thiện chất lượng của quá trình tái tạo và hiệu suất hoạt động; đồng thời, nó cũng có thể tách protein đích và protein tạp chất để đạt được mục đích tinh sạch; và thuận tiện để phục hồi chất biến tính.

Protein là một đại phân tử sinh học liên quan đến sự sống, là chất không thể thiếu để duy trì sự tiến triển bình thường của sự sống, đồng thời nó cũng là mã di truyền sự sống thế hệ thứ hai. Nhiều nghiên cứu khác nhau về protein cũng là chủ đề được nhiều người quan tâm hơn, và nghiên cứu về cấu trúc của nó cũng rất quan trọng đối với sự tiến bộ của y học. Sự biến tính hay biến tính của protein là một trong những vấn đề cốt lõi trong nghiên cứu khoa học sự sống. Trong số đó, kẻ biến tínhguanidine hydrochloridekhông chỉ có thể làm biến tính protein, tạo điều kiện thuận lợi cho việc nghiên cứu cấu trúc của nó, mà còn có thể hòa tan protein cơ thể bao gồm trong quá trình biến tính. Đóng một vai trò thiết yếu trong nghiên cứu.